应用
荧光素酶报告系统也可以作为细菌荧光素酶报告系统的一个替代,特别是对监测环境应激具有重要意义.由于应用荧光素酶的成本低、应用范围广,chemicalbook所以被广泛应用于检测某些特殊细菌、厌氧微生物,监控生长缓慢的微生物,用于食品、饮料、自来水、化妆品、药物检测,河流水质、大气环境的监测。
制备
作为fl生产原料的萤火虫,要依靠人工捕捉或养殖,受地域和季节性限制,且该生物生产周期长、养殖成本高、提取的酶成分复杂,随着分子生物学的发展,人们转向用基因工程的方法进行生产。1985年,dewet,j.r.等首次克隆了p.pyralis的fl基因,并在大肠杆菌(escherichiacoli)中表达,从中得到具有活性的fl。1986年,他们测定了fl基因的cdna序列。随后,各种发光甲虫的fl基因相继克隆成功,并能在原核和真核表达系统中表达。取自p.pyralis长约1.8kb的cdna基因在e.coli表达的产物是分子量为6chemicalbook2kd,含550个氨基酸的多肽链,与自然提取得到的fl相比,具有同样的反应动力学特性和发射波长,在相同的反应条件下酶的稳定性亦无差异。萤火虫荧光素酶基因通过克隆在e.coli表达,转化体在37℃、lb培养基中生长到对数后期收集菌体,用渗透压法、冻融法提取细菌胞质组分,经均质、离心,用凝胶排阻、离子交换色谱提取纯酶,冷冻干燥保存。bl可从培养发光细菌直接提取得到,其制备方法与fl类似。从v.harveyi中提取的酶活可达1.8×1011lu/mg,为获得特殊用途**l,亦可通过诱变或基因克隆得到。各种发光细菌的基因克隆均有许多报道。
生物活性
luciferase, firefly 是一种发光酶,负责萤火虫和磕头虫的生物发光。

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